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米爾貝霉素A3和A4高產菌的理性選育

作者:admin 發布時間:2019/08/30 瀏覽量:1682

       本期為您推薦浙江海正藥業股份有限公司,浙江省抗真菌藥物重點實驗室白驊研究團隊發表在《中國抗生素雜志》上的一篇文章:米爾貝霉素A3A4高產菌的理性選育。

文章摘要內容如下:

米爾貝霉素(milbemycin)于1967年在吸水鏈霉菌S.hygroscopicus subsp.aureolacrimosus的發酵液中首次發現,其結構屬十六元大環內酯類化合物,是生態友好型天然產物農藥。米爾貝霉素A3A4組分混合物(A3:A4=3:7)產品被用做植物蟲害的防治,但由于產品對A3/A4的比例(3:7)有著嚴格的要求且一般菌種很難滿足這一比例,通過提取工藝的優化來解決比例問題會導致生產成本過高,且米爾貝霉素A3/A4在結構上非常相似,如果能夠實現A3A4單一組分的生產,且進一步提高發酵單位,降低成本,則可避開多組分產品的市場限制,推動該類產品在國內的使用。

本研究以吸水鏈霉菌CGMCC7677為出發菌,通過紫外、甲基磺酸乙酯與常壓室溫等離子體等單獨誘變或組合誘變,結合含甘氨酸、利福平、乙酸鈉和3-溴丙酮酸的抗性平板進行篩選,最終得到米爾貝霉素突變株75-2295-23。在不改變培養基組成和培養條件的情況下,75-22在50L發酵罐中培養360h,米爾貝霉素A41)的生產能力提高了5倍,米爾貝霉素A41)的含量也從70%提高至80%以上。95-23在50L發酵罐中培養360h,米爾貝霉素A32)的生產能力提高了10倍,米爾貝霉素A32)的含量提高至70%以上。主產單一組分菌種的獲得,可進一步擴大米爾貝霉素的應用研究范圍,也為米爾貝霉素的產業化提供了優良的菌種。

文章精彩內容如下:

圖片1


2 米爾貝霉素生產菌CGMCC7677選育譜系圖

GlyR:甘氨酸抗性;RifR:利福平抗性;AcetR:乙酸鈉抗性;3-BropyR:3-溴丙酮酸抗性



圖片2

3 選育過程中形成的兩種形態突變株

A:原始菌種;B1組分高比例菌株;C2組分高比例菌株;D:兩種形態突變株在平板上生長時的背面差異



圖片3

6 突變株75-2250L發酵罐中的代謝曲線



圖片4

7 突變株95-2350L發酵罐中的代謝曲線


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