<strike id="jz9f9"><dl id="jz9f9"></dl></strike>
<strike id="jz9f9"><dl id="jz9f9"><del id="jz9f9"></del></dl></strike>
<span id="jz9f9"><video id="jz9f9"><ruby id="jz9f9"></ruby></video></span>
<span id="jz9f9"><dl id="jz9f9"></dl></span>
<strike id="jz9f9"><video id="jz9f9"><ruby id="jz9f9"></ruby></video></strike>
<span id="jz9f9"></span>
咨詢電話:0510-66901819

當前位置:首頁>>資訊中心>>應用案例
當前位置:應用案例

代謝工程改造大腸桿菌生產琥珀酸

作者:admin 發布時間:2021/07/28 瀏覽量:902


本期為您推薦江南大學食品科學與技術國家重點實驗室,國際食品安全聯合實驗室劉立明教授研究團隊發表在《化工進展》上的一篇文章:代謝工程改造大腸桿菌生產琥珀酸。

 

文章摘要內容如下:

琥珀酸作為一種重要的四碳二羧酸,在食品、化學、制藥以及農業等領域具有廣泛的應用價值。由于化學合成法生產琥珀酸存在很多弊端,近年來以微生物細胞工廠利用可再生資源生產琥珀酸受到了越來越多的關注。然而,微生物法生產琥珀酸存在得率低、生產強度低、副產物積累等問題。

 

本研究通過復合誘變(ARTP和60Co-γ射線)篩選到一株耐高滲突變菌FMME-N-2,其琥珀酸得率為0.70g/g葡萄糖,同時積累18.8g/L乳酸,7.6g/L甲酸和17.3g/L乙酸。為了提高琥珀酸得率,通過敲除乳酸脫氫酶基因(ldhA)、丙酮酸-甲酸裂解酶-甲酸轉運蛋白基因(pflB-focA)、磷酸轉乙?;颍?i>pta)丙酸激酶基因(tdcD)和a-酮丁酸甲酸酯裂解酶基因(tdcE),阻斷冗余代謝支路減少副產物積累,獲得工程菌株FMME-N-13,琥珀酸得率增加到0.92g/g葡萄糖,同時副產物大大降低,積累0.6g/L乳酸,3.6g/L甲酸和12.3g/L乙酸。同時,通過調控RBS強度組合優化來自產琥珀酸放線桿菌的磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶基因(AsPCK)和來自博伊丁假絲酵母的甲酸脫氫酶基因(CbFDH)的表達水平,調控胞內ATP和NADH的濃度,最優工程菌FMME-N-26(FMME-N-13-L-AsPCK-L-CbFDH)的琥珀酸得率增加至1.04g/g葡萄糖,僅積累5.5g/L乙酸;最終,對厭氧階段葡萄糖濃度進行優化,當葡萄糖濃度控制在0-5g/L時,菌株FMME-N-26的琥珀酸濃度增加到111.9g/L,得率為1.11g/g葡萄糖(理論產率的99%),生產強度為1.76g/L/h,為琥珀酸的工業化生產奠定了良好的基礎。

 

文章精彩內容如下: 

圖片1

2 耐高滲琥珀酸生產菌株的篩選與表征


圖片2

4 調控AsPCK與CbFDH的表達優化輔因子含量

 

圖片3

5 菌株FMME-N-26的兩階段發酵結果

亚洲中文久久久久久精品国产,无码毛片一区二区三区本码视频,无码毛片高潮一级一,色噜噜久久综合伊人一本